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Evaluación de las respuestas de la vacuna de ARNm con un ensayo alternativo de neutralización viral del SARS-CoV-2

Se requiere la evaluación de la inmunidad de un individuo al SARS-CoV-2, el virus responsable de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19), porque las respuestas de la vacuna y / o la protección de una infección previa pueden disminuir con el tiempo. Uno de los métodos tradicionales que se ha utilizado para determinar los niveles de anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 en una prueba de neutralización por reducción de placa (PRNT). A pesar de la utilidad de esta técnica, es laboriosa y requiere condiciones de trabajo de Nivel de Bioseguridad 3 (BSL3) debido al uso de virus vivos, y no suele dar resultados definitivos hasta pasados ​​varios días.

Stady: Desarrollo y uso de un ensayo alternativo de neutralización viral del SARS-CoV-2 para evaluar las respuestas de la vacuna de ARNm. Haber de imagen: 18percengrey / Shutterstock.com

Los anticuerpos neutralizantes que se desarrollan durante la infección con el SARS-CoV-2 se dirigen al dominio de unión al receptor (RBD) de la proteína viral spike (S). El RBD juega un papel en la entrada del SARS-CoV-2 en el huésped al unirse al receptor de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) ubicado en las células epiteliales de las vías respiratorias. Muchos anticuerpos monoclonales humanos pueden unirse a la proteína de pico RBD, pero no pueden inhibir la infección. en el laboratorio.

«Se desarrollaron dos anticuerpos monoclonales humanos específicos de RBD para inmunoterapia pasiva y mostraron efectos terapéuticos positivos cuando se administraron temprano en el contexto de COVID-19l».

En el estudio actual, que se publicó originalmente en un servidor de preimpresión medRxiv*En este estudio, los autores evaluaron varios ensayos de inmunoabsorción ligados a enzimas (ELISA) que pueden usarse para medir anticuerpos séricos capaces de bloquear la unión de RBD-ACE2r y, por lo tanto, pueden vincularse a la neutralización de virus vivos.

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sobre estudiar

En el estudio actual se incluyó un total de 32 pacientes con COVID-19, ninguno de los cuales fue hospitalizado o experimentó síntomas graves de COVID-19. De hecho, algunos de los participantes estaban asintomáticos mientras estaban infectados con SARS-CoV-2.

La cantidad de anticuerpo neutralizante para estos pacientes ya se ha determinado con la ayuda de PRNT. El estudio también incluyó a 41 personas después de la vacunación y 14 personas que se habían recuperado de COVID-19 y no habían sido vacunadas.

Se realizó un ELISA competitivo utilizando muestras de suero de personas que se habían recuperado de COVID-19, así como de personas que habían sido vacunadas. También se realizó una prueba ELISA competitiva para pacientes con COVID-19 y el valor se comparó con PRNT.

También se midió la actividad de neutralización en individuos que recibieron dos vacunas diferentes; Estas son las vacunas de ácido ribonucleico mensajero (ARNm) de Pfizer-BioNTech y Moderna. Los cambios en la actividad neutralizante alternativa se controlaron hasta 6 meses después de la vacunación en varios participantes.

Inhibición de la unión de ACE2r a RBD por suero de diferentes grupos de individuos. Capacidad de suero de diferentes grupos de individuos (descrito en tabla 1) para evitar la unión de ACE2r a RBD mediante ELISA competitivo y cálculo de IC cruzado50 Los valores se muestran en el eje y. Los datos son de grupos de sujetos etiquetados con tabla 1 como se nombra. Cada icono representa a una persona diferente. Los valores medios están marcados con una barra en el gráfico anterior y se muestran en tabla 1, junto con el IC del 95% y los valores de p para los grupos con diferencias significativas.

Resultados

El estudio inicialmente tuvo varios problemas técnicos que finalmente se superaron mediante el uso de ELISA competitivo coordinado en sentido inverso para medir los niveles de anticuerpos en la sangre.

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En conjunto, se observaron diferencias significativas en la actividad neutralizadora sustituta para las personas vacunadas después de la infección con COVID-19 en comparación con las personas no vacunadas con antecedentes de COVID-19 que recibieron diferentes vacunas.

Los datos también mostraron un pico seguido de una lenta disminución en el anticuerpo neutralizante desde el día 35 al día 200 después de la primera dosis de vacuna. También se observó que los individuos vacunados con antecedentes de COVID-19 tenían niveles más altos de anticuerpos neutralizantes sustitutos en comparación con aquellos sin una infección previa. Por lo tanto, puede implicar que una inyección de refuerzo o una tercera exposición pueden proporcionar protección adicional.

Este estudio también mostró una disminución en el anticuerpo sustituto neutralizante durante 6 meses después de la vacunación. Esta observación es particularmente preocupante porque muestra que la protección conferida por las vacunas de ARNm actuales contra la infección por SARS-CoV-2 está disminuyendo.

conclusión

«El uso de las pruebas actuales puede ser un enfoque factible para evaluar la protección del SARS-CoV-2 para una población más grande e identificar los factores de riesgo de una respuesta subóptima a una vacuna o respuestas disminuidas con el tiempo».

Existen ciertas debilidades asociadas con el estudio actual, que incluye un número limitado de sujetos por grupo clínico, una falta de asociación entre brindar protección y actividad neutralizante, y una falta de participantes menores de 18 años, cuyo sistema inmunológico puede ser diferente al de el de los adultos.

«Se necesitan con urgencia más estudios para comprender la heterogeneidad y duración de las respuestas de neutralización del suero inducidas por la vacuna COVID-19 en poblaciones más grandes y su relación con los resultados clínicamente relevantes de la exposición e infección al SARS-CoV-2».

*Nota IMPORTANTE

medRxiv Publica informes científicos preliminares que no han sido revisados ​​por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, guiar la práctica clínica / comportamiento relacionado con la salud o tratarse como información establecida.

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